溶菌酶溶液（10mg/ml）
● 產(chǎn)品規(guī)格:
10 ml
● 產(chǎn)品內(nèi)容:
|
名稱
|
貨號(hào)
|
規(guī)格
|
貯存溫度
|
運(yùn)輸溫度
|
|
溶菌酶 (干粉)
|
LS004-01
|
100 mg
|
-20℃
|
常溫
|
|
溶菌酶溶解液
|
LS004-02
|
10 ml
|
-20℃
|
常溫
|
● 保存條件：
未配制的溶菌酶干粉和溶解液-20℃保存，有效期24個(gè)月；配制好的溶液-20℃貯存有效期12個(gè)月。
● 產(chǎn)品說明:
Lysozyme，中文名為溶菌酶，EC Number:3.2.1.17，CAS:
12650-88-3，活性>20KU/mg，純化自蛋清(egg white)，不含DNase、RNase和Protease，可以用于以質(zhì)粒抽提、蛋白純化等為目的的細(xì)菌裂解。
● 溶液配制方法：
取10
ml溶解液加到溶菌酶干粉中，徹底溶解，即配成10
ml（10mg/ml）的溶菌酶溶液，-20℃保存。
● 使用方法：
細(xì)菌裂解：
1.
細(xì)菌過夜培養(yǎng)菌液10 ml 12,000 rpm離心 5 min 后，棄上清，盡量棄除殘余培養(yǎng)基，留取管底部菌體。
2.
加入1 ml細(xì)菌裂解液，50μl
10mg/ml 溶菌酶溶液，用吸頭吹打至無可見細(xì)胞團(tuán)塊，重懸菌體。
注：此步驟可加入蛋白酶抑制劑如PMSF，保護(hù)蛋白，抑制降解；如裂解液比較粘稠，可以加入DNaseI溶液，消化基因組DNA。
3.
37℃孵育20 min，期間輕彈離心管數(shù)次以加速裂解。
注：溶菌酶的用量和處理時(shí)間與處理的細(xì)菌種類密切相關(guān)，用戶可以根據(jù)細(xì)菌種類進(jìn)行調(diào)節(jié)。如革蘭氏陽性菌應(yīng)將處理時(shí)間延長到30-60分鐘。
4.
裂解完成后 13,000rpm4℃離心5
min，將上清（上清中即為可溶性蛋白）轉(zhuǎn)移至新的離心管中，直接進(jìn)行下一步純化或檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。